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定氮儀等三款儀器對于蛋白質測定分析

更新時間:2013-05-21      點擊次數:1582

    食品中蛋白質含量測定方法多有報導,如凱氏定氮儀法、酚試劑法、雙縮尿法、光度法、甲醛滴定法和電流法等,但都存在著操作繁瑣、費時等不足,而且文獻報道基本是采用進口儀器,不適合一般實驗室使用。經典的凱氏定氮儀法是在食品分析、營養和生化研究中廣泛應用的方法,但操作也較為繁瑣,耗時較長,作為本科學生實驗無法在規定的時間內完成整個測定過程;同時大量試劑消耗造成資源浪費。
      本文利用控溫消解爐同時可以消解多個樣品,利用定氮儀自動完成加堿、定量蒸餾吸收。自動電位滴定儀具有準確度高和自動化程度高的特點。本文測定糧食中蛋白質的含量,對消解條件進行了摸索,并與國標法進行了比對。試劑:K2S04;CuS04•5H2O;H2S04;H3B03;NaOH(試劑均為分析純)。精稱0.1~0.5g糧食樣品于干燥的消解管中,加入0.3gCuS04•5H20、1.0gK2S04和5mLHzS04搖勻,加熱,消解;待反應液呈藍綠色澄清透明后,繼續加熱10min后取下冷卻至室溫。將上述消解管直接卡于凱氏定氮儀,將裝有20mL硼酸溶液的錐形瓶置于凱氏定氮儀吸收架,加堿至液體呈棕褐色,蒸餾至凱氏定氮儀發出信號后,取下錐形瓶,并置于全自動電位滴定儀,用硫酸標準溶液滴定,按上述方法考察試劑空白。按照GB/T5009.5-2003方法進行測定Ⅲ。
      實驗考察了樣品量與消化劑用量對測定結果的影響,當樣品量為0.1~0.5g時;CuSO4、K2SO4和H2SO4試劑用量分別為0.39、1.0g和5mL時消解效果zui為理想,消解速度快,吸收及電位滴定效果較好,其測定值符合要求。當樣品量過大時,則消解、吸收、滴定效果均不理想。設置不同的消解時間,測定樣品的蛋白質含量。加熱10min的測定值與國標法測定值接近。取蛋白質含量不同的4種樣品,分別加標(硫酸銨)回收率實驗,硫酸氨的回收率均在99.0%以上。采用本法與國標定氮法分別測定4種樣品蛋白質含量。結果表明,兩種方法無顯著性差異(P=0.95)時,量值<2.30,符合要求。取蛋白質含量不同的4種樣品,平行測定5次,相對平均偏差(RSD)均小于1.0%,表明該法的精密度良好。
      本方法利用三種儀器測量食品中蛋白質的含量,具有較高的準確度和精密度,操作簡便、快速、省時、省力,設備價格低,易于推廣,且試劑用量少,降低實驗成本,同時也減少了對環境的污染,這不僅能使本科學生在規定時間內完成整個實驗過程,還可以讓學生在一般基礎實驗室學到、用到較先進的儀器。

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